Foszforilezés módosítása
A foszforilált fehérjékkel és peptidekkel kapcsolatos kutatások segíthetnek az embereknek a fenti folyamat mechanizmusának tisztázásában és az élettevékenységek természetének további megértésében. Az utóbbi években a proteomikai technológia folyamatos fejlődésével a fehérjék foszforilációjának vizsgálata egyre nagyobb figyelmet kapott. Számos természetes toxin és kórokozó is az intracelluláris fehérjék foszforilációs állapotának megváltoztatásával fejti ki hatását.
A foszforilált polipeptidek főként a Ser, Tyr és Thr csoportokra utalnak. A maradék oldallánc hidroxilcsoportja savas foszfát polipeptiddé módosul. Eddig a polipeptidek foszforilációs módosítása főként poszt{1}}foszforilációs módszert és két szintézis módszert foglal magában:
Monomer módszerrel módosítva a foszforilált aminosav a nagyobb oldallánc módosító csoport okozta sztérikus gátlás miatt nehezen kondenzálódik a peptidlánccal, és az ezt követő aminosav bejuttatása is nehezebb lesz. Különösen akkor, ha többszörös foszforilációs hely módosításokat tartalmaz, a szintézis rendkívül nehézzé válik, és a végtermék összetett komponenseket tartalmaz, nehezen szétválasztható és rendkívül alacsony hozamú. Ezért, ha a peptidlánc több helye foszforilálódik, megfontolható a poszt-foszforilációs módszer. A fő szintézis folyamat a jelölendő aminosavak oldallánc védőcsoportjainak szelektív eltávolítása a polipeptid szintézis befejezése után. A Tyr, Thr aminosavak nem védett oldalláncokkal közvetlenül használhatók a reakcióhoz. Oldallánc védőcsoport 1% TFA/DCM-nél Bizonyos körülmények között kvantitatívan eltávolítható. A poszt-foszforiláció során bisz-benzil-foszforamidit használható. A tetrazol létrehozza a foszforamidit-tetrazol aktív köztiterméket, amely a hidroxilcsoporthoz kapcsolódik, majd peroxisav körülmények között oxidálódik, hogy foszforilcsoportot hozzon létre a reakció befejezéséhez.
- pSer, pTyr, pThr és D-pSer, D-pTyr, D-pThr foszforiláció módosítási szolgáltatásokat nyújtunk.
- Egyidejűleg 2 hely, 3 hely, 4 hely és 5 hely foszforilációs módosítása hajtható végre.
Foszforilezett peptidek Szintetikus eset (Thr(HPO3), Tyr(HPO3), Ser(HPO3) várj)
1. A szekvenciában 4 foszforilációs hely található (xxxpSpTxxxpSxxxpTx), a tisztaság 95%, a befejezési ciklus 3 hét.
